考试概要
高通量筛选（HCS）是一种兼具荧光显微镜、流式细胞仪及高通量筛选等分析方法优势的分析技术。有时也被称为高通量分析（HCA）。该技术能够实现基于细胞的高速成像分析，可从细胞成像、图像数据的定量分析到分析结果的呈现，提供一条完整的分析流程。在粘附细胞的分析中表现尤为出色。其特点在于能够将细胞的荧光图像转化为数值。
在药物研发领域，我们利用细胞进行化合物、抗体药物、核酸药物等的评估筛选试验。此外，我们也承接以探索化妆品及功能性食品新原料为目的的筛选试验。该技术在再生医学领域同样具有应用价值。
本公司引进了Operetta CLS和Opera Phenix Plus（Reviti公司制造）作为HCS设备。Operetta CLS和Opera Phenix Plus是能够以高速、高分辨率应对各种应用的HCS设备，在全球市场占有率位居前列。我们将利用这些设备，针对各类细胞开展定制化试验。
欢迎随时垂询。
使用设备
Operetta CLS (Revvity)
Opera Phenix Plus (Revvity)
高内容分析的特点
- 可从单个细胞中获取各种定量数据
- 细胞形态、定位等特征也可进行定量分析
- 能够高速处理大量样本
- 可直接分析贴壁细胞和三维结构
- 从测量到分析一体化
- 多种分析应用
- 支持高级分析
图像分析应用程序示例
我们还可提供分析定制服务，以及对其他成像设备所用协议的复现等支持。
对细胞等的准确识别
Operetta CLS 和 Opera Phenix Plus 能够根据成像数据，自动对细胞等进行高精度识别。
凋亡分析示例
通过用斯塔乌洛斯普林处理HeLa细胞，诱导了细胞凋亡。经药物处理4小时后，进行了固定。使用DRAQ5（红色）对细胞核进行染色，并使用Alexa488标记的抗Caspase-3抗体（绿色）对作为凋亡调控因子的Caspase-3进行染色。可以看出，随着斯塔罗司烷浓度的增加，Caspase-3被激活（左图），并出现了核凝集和核碎裂（右图）。由此可见，针对不同浓度（多组）的样本，可以同时分析Caspase-3活性、核大小以及碎裂率等多项参数。
神经突起分析示例
将大鼠初代后根神经节细胞与星形胶质细胞共培养4天，在给予NGF及各化合物（Comp. A、Comp. B）27小时后，用DRAQ5（红色）对细胞核进行染色，用Alexa 488标记的抗Tuj1抗体（绿色）对神经细胞进行染色。通过Tuj1染色图像识别神经突起区域，并对面积进行定量分析。Operetta CLS和Opera Phenix Plus能够对经多种浓度条件下化合物处理的样本进行高速、高分辨率的图像分析，并以神经突起区域的减少为指标，探究化合物的神经毒性浓度范围。
其他
还可以结合siRNA介导的基因敲低实验或基因过表达实验进行检测。
对于悬浮细胞，使用流式细胞仪进行分析会更有效。
参考文献
●少突胶质细胞分化的定量分析，组织切片中MBP含量的定量测定
Drug-based modulation of endogenous stem cells promotes functional remyelination in vivo
Najm FJ et al., Nature 2015
●肌管细胞分化的定量分析
Genome-Wide Exploration of miRNA Function in Mammalian Muscle Cell Differentitation
Polesskaya A et al., PlosOne 2013
●确认球体形成
Evaluation of chemotherapeutics in a three-dimensional breast cancer model
Lovitt CJ et al., J Cancer Res Clin Oncol. 2015
●利用蛋白质间相互作用的筛选方法
Visualization and targeted disruption of protein interactions in living cells
Herce HD et al., Nat Communications 2013
●利用BRET测定蛋白质间相互作用
Nanoluciferase Signal Brightness Using Furimazine Substrates Opens Bioluminescence Resonance Energy Transfer to Widefield Microscopy
Jiho Kim, Regis Grailhe., Cytometry A. 2016
※考试将主要由拥有博士学位的人员负责。
